IA-2抗體檢測(cè)試劑盒檢驗(yàn)方法
更新時(shí)間：2018-02-05 點(diǎn)擊次數(shù)：1099次
IA-2抗體檢測(cè)試劑盒原理：
IA-2抗體檢測(cè)試劑盒是采用豬瘟抗原包被微孔板，在試驗(yàn)中，加入稀釋的對(duì)照血清和待檢血清，經(jīng)溫育后，若樣品中含有抗豬瘟病毒的特異性抗體，則將與檢測(cè)板上抗原結(jié)合，經(jīng)洗滌除去未結(jié)合的抗體和其他成分后；再加入酶標(biāo)二抗，與檢測(cè)板上抗原抗體復(fù)合物發(fā)生特異性結(jié)合；再經(jīng)洗滌除去未結(jié)合的酶結(jié)合物，在孔中加TMB底物液，與酶反應(yīng)形成藍(lán)色產(chǎn)物，加入HF溶液終止反應(yīng)后，用酶標(biāo)儀630nm波長(zhǎng)測(cè)定各反應(yīng)孔中的OD值。
IA-2抗體檢測(cè)試劑盒檢驗(yàn)方法：
1. 配液： 用蒸餾水或去離子水將1瓶濃縮洗滌液全部稀釋至450ml。
2. 編號(hào)： 將樣本對(duì)應(yīng)的微孔按序編號(hào)，每板設(shè)陰性對(duì)照3孔、陽(yáng)性對(duì)照2孔和空白孔1孔（雙波長(zhǎng)測(cè)定可不設(shè)空白孔）。
3. 加樣： 每孔加100μl（或2滴）樣本稀釋液，空白孔不加。分別在相應(yīng)的孔中加入樣本或陰、陽(yáng)對(duì)照10μl，輕輕振蕩混勻。
4. 溫育： 用封板膜封板后放入37±1℃溫箱溫育45±1分鐘。
5. 洗滌： 小心揭掉封板膜，用洗板機(jī)洗滌5次（也可手工洗板），每次浸泡30秒，洗滌時(shí)各孔均需加滿(mǎn)洗滌液，zui后一次在吸水紙上盡量拍干。
6. 加酶： 搖勻后每孔加100μl（或2滴）酶結(jié)合物，空白孔不加，輕輕振蕩混勻。
7. 溫育： 用另一張封板膜封板后放入37±1℃溫箱溫育30±1分鐘。
8. 洗滌： 操作同第5步。
9. 顯色： 每孔先加50μl（或1滴）顯色劑A，然后加50μl（或1滴）顯色劑B（包括空白孔），37±1℃避光顯色10±1分鐘。
10.測(cè)定： 每孔加50μl（或1滴）終止液終止反應(yīng)，輕輕振蕩混勻，10分鐘內(nèi)在波長(zhǎng)450nm下分別測(cè)定各孔的吸光值A(chǔ)值。（單波長(zhǎng)酶標(biāo)儀需空白孔調(diào)零，雙波長(zhǎng)酶標(biāo)儀不需空白孔調(diào)零）。
IA-2抗體檢測(cè)試劑盒預(yù)期用途：本試劑盒用于檢測(cè)待測(cè)血清或血漿樣品中可能存在的結(jié)核分枝桿菌IgG抗體。在臨床診斷中作為結(jié)核分枝桿菌感染的輔助診斷。結(jié)核分枝桿菌（MTB）是結(jié)核病的致病菌，屬分枝桿菌屬，是一種特殊的圓桿狀細(xì)菌，細(xì)胞壁富含脂類(lèi)，抗酸染色，又叫抗酸桿菌。MTB的宿主是人，主要通過(guò)結(jié)核病人含有該細(xì)菌的氣溶膠（aerosol）進(jìn)行傳播。人體除毛發(fā)外幾乎全身所有組織都可以感染結(jié)核病，如腸結(jié)核、骨結(jié)核、淋巴結(jié)核等。
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