詳解AChRAb試劑盒的具體操作步驟
更新時(shí)間:2023-10-25 點(diǎn)擊次數(shù):442次
AChR(AcetylcholineReceptor)是神經(jīng)肌肉接頭的重要成分,也是神經(jīng)遞質(zhì)乙酰膽堿傳遞信號(hào)的主要受體??梢杂糜谘芯科渌c乙酰膽堿受體相關(guān)的自身免疫性疾病和機(jī)制,如重癥肌無(wú)力(MyastheniaGravis)等,對(duì)于相關(guān)疾病的早期診斷、疾病發(fā)展的預(yù)測(cè)和患者治療方案的制定具有重要意義。
AChRAb試劑盒是一種用于檢測(cè)人體中AChR抗體的試劑盒,采用間接熒光免疫法(IIF)進(jìn)行檢測(cè)。該方法基于免疫熒光顯微鏡技術(shù),通過(guò)觀察標(biāo)記抗體與標(biāo)本中的AChR抗體結(jié)合后的熒光信號(hào)強(qiáng)度來(lái)判斷AChR抗體的存在與水平。
具體操作步驟如下:
1.標(biāo)本制備:將待測(cè)血清樣本稀釋后滴加到載玻片上,干燥定型。
2.孵育:將載玻片與含有培養(yǎng)基和抗人IgG抗體標(biāo)記的熒光素共價(jià)的二抗混合液滴加,使其充分接觸。在室溫下孵育一段時(shí)間,使AChR抗體與標(biāo)記二抗結(jié)合。
3.洗滌:將載玻片放入含有緩沖液的洗滌盒中,用洗滌液洗滌去除未結(jié)合的二抗。
4.觀察:將洗滌后的載玻片放入熒光顯微鏡中觀察。當(dāng)樣本中存在AChR抗體時(shí),標(biāo)記二抗與AChR抗體結(jié)合,產(chǎn)生熒光信號(hào)。熒光信號(hào)的強(qiáng)度與AChR抗體的濃度成正比。
AChRAb試劑盒是將待測(cè)血清中的AChR抗體與免疫熒光試劑盒中的抗人IgG抗體標(biāo)記的熒光素共價(jià)的二抗發(fā)生特異性結(jié)合。然后,通過(guò)洗滌去除未結(jié)合的二抗,使結(jié)合到載玻片上的AChR抗體-二抗復(fù)合物保留在載玻片上。在熒光顯微鏡下觀察被標(biāo)記的AChR抗體的熒光信號(hào),根據(jù)信號(hào)強(qiáng)度判斷AChR抗體的存在與水平。
AChRAb試劑盒的原理簡(jiǎn)單明了,具有高度的敏感性和特異性。通過(guò)該試劑盒可以快速準(zhǔn)確地檢測(cè)人體中AChR抗體的水平,用于早期診斷和監(jiān)測(cè)多種自身免疫性疾病,如重癥肌無(wú)力和藥物相關(guān)性肌無(wú)力等。它在臨床診斷中的應(yīng)用有非常廣泛的前景。